Een wetenschappelijke methode voor het kwantificeren van NMN in biologische monsters
1. Inleiding
Suppletie vannicotinamide mononucleotide (NMN)om het niveau van nicotinamide te verhogen, is aangetoond dat adenine dinucleotide (NAD+) een veelbelovende anti-verouderingsinterventie is. Het is echter nog steeds een serieuze uitdaging om NAD+ tussenproducten nauwkeurig te kwantificeren,NMNin het bijzonder. Deze studie is bedoeld om een nieuwe methode te introduceren, dubbele isotoop-gemedieerde LC-MS/MS-methodologie (dimeLC-MS/MS), voor de nauwkeurige kwantificering vanNMNin biologische monsters.
2. Factoren die van invloed zijn op de nauwkeurige detectie van NMN
NMN is moeilijk nauwkeurig te detecteren vanwege zijn kwetsbaarheid voor enzymatische degradatie, conversie in monsterverwerking, zijn complexe gedrag in verschillende kolom- en extractieomstandigheden, evenals het matrixeffect.
Concreet heeft NMN de eigenschappen van hoge polariteit en lage vluchtigheid, die gemakkelijk op te lossen is in water, maar moeilijk op te lossen in organische oplosmiddelen. Deze eigenschappen beperken de toepassing van veel conventionele kwantitatieve analysemethoden aanzienlijk.
BAnalytische monsterszoalsbloed draagt significante activiteiten van CD38 en CD73 (ecto-5’-nucleotidase), die beide NMN als substraat zouden kunnen gebruiken.
Het gedrag van NMN in de kolom is zeer complex, waarschijnlijk vanwege de bipartiete aard van de ladingen, zodat subtiele verschillen in extractie en kolomcondities de betrouwbare en nauwkeurige detectie van NMN aanzienlijk beïnvloeden.
3. Copingstrategieën vandubbeltjeLC-MS/MSom de impact van impactfactoren te verminderen
Om de interferentie van bovengenoemde factoren te voorkomen, wordt een prototype kolom NMN-2 toegepast. Deze kolom bevat op C18 gebaseerde zeer zuivere silicadeeltjes die beter in staat zijn om hydrofiele verbindingen te binden dan koolstofdeeltjes, waardoor het scheidingsvermogen wordt verbeterd.
Perchloorzuur (PCA) wordt gebruikt omdat het NAD+ en NMN efficiënt kan extraheren uit biologische monsters zoals plasma met minimale verliezen.
Om te corrigeren voor matrixeffecten, wordt een vaste hoeveelheid (1 μM) van elke isotopische verbinding toegevoegd aan biologische monsters voorafgaand aan de PCA-extractie.
4. Het voordeelsvan dubbeltjeLC-MS/MS
Dubbele isotopische NMN-standaarden, NMN (M + 14) en NMN (M + 5), in de LC-MS/MS-gestuurde methodologie kunnen het lot van NMN tijdens de monsterverwerking nauwkeurig traceren, wat de nauwkeurigheid en de betrouwbaarheid van NMN-metingen in biologische monsters aanzienlijk verhoogt. Bovendien kan dimeLC-MS/MS de extractie-efficiëntie en de absolute concentraties van NMN in verschillende soorten biologische monsters evalueren.
5. Conclusie
Þisnieuwe LC-MS/MS-gestuurde methodologie met dubbele isotopische NMN-standaarden kan NMN nauwkeurig en betrouwbaar meten in biologische monsters.Het kan worden gebruikt voor toekomstige studies naar NMN-inname.
6. Verwijzing
Unno, Junya et al. "Absolute kwantificering van nicotinamide-mononucleotide in biologische monsters door dubbele isotoop-gemedieerde vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie (dimeLC-MS/MS)." npj veroudering vol. 10,1 2. 2 januari 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Waarom kiezenBONTAC?
BONTACis de leider van de wereldwijdeNMNindustrie. We hebben de eerste katalysetechnologie voor hele enzymen in China en zijn de toonaangevende onderneming geworden in co-enzymproducten die veel worden gebruikt in de gezondheidsindustrie, medische en schoonheidsproducten, groene landbouw, biogeneeskunde en andere gebieden. BONTAC is met name NMNgrondstofleverancier van het beroemde David Sinclair-team aan de Harvard University. Onze diensten en producten zijn betrouwbaar. BovendienBONTACheeft een onafhankelijk onderzoekscentrum voor co-enzymtechnologie op provinciaal niveau in China en eigen fabrieken, waar de zuiverheid en stabiliteit van producten kan worden gegarandeerd.
Disclaimer
ÞisArtikel isGebaseerd op de referentie in deacademisch tijdschrift. De relevante informatie isverschaffenAlleen voor deel- en leerdoeleinden, en vertegenwoordigt geen medisch advies. Als er sprake is van een inbreuk, alstublieftcontactDe auteurvoordeletion. De standpunten in dit artikel vertegenwoordigen niet het standpunt vanBONTAC.