1. Inleiding

Suppletie vannicotinamide mononucleotide (NMN)om deniveauvannicotinamide adenine dinucleotide (NAD+)is onthuld als een veelbelovende anti-verouderingsinterventie. Het is echter nog steedseen serieuze uitdaging om nauwkeurig teNAD+-tussenproducten kwantificeren, Nmn in het bijzonder. Deze studie is bedoeld om een nieuwe methode te introduceren, dubbele isotopen-gemedieerde LC-MS/MS-methodologie (dimeLC-MS/MS), voor de nauwkeurige kwantificering vanNmn in biologische monsters.

2. Factoren die van invloed zijn op de nauwkeurige detectie van NMN

NMN is moeilijk nauwkeurig te detecteren vanwege de kwetsbaarheid voor enzymatischedegradatie, conversie in monsterverwerking, het complexe gedrag ervan in verschillende kolom- en extractieomstandigheden, evenals matrixeffect.


NMN heeft met name de eigenschappen van hoge polariteit en lage vluchtigheid, die gemakkelijk op te lossen is in water, maar moeilijk op te lossen in organische oplosmiddelen. Deze eigenschappen beperken de toepassing van veel conventionele kwantitatieve analysemethoden aanzienlijk.

Biologische monsterszoalsbloed bevat significante activiteiten van CD38 en CD73 (ecto-5'-nucleotidase), die beide NMN als substraat zouden kunnen gebruiken.

Het gedrag van NMN in de kolom is zeer complex, waarschijnlijk vanwege de bipartiete aard van de ladingen, zodat subtiele verschillen in extractie en kolomcondities de betrouwbare en nauwkeurige detectie van NMN aanzienlijk beïnvloeden.

3. Copingstrategieën vandimeLC-MS/MSom de impact van impactfactoren te verminderen

Om interferentie van bovengenoemde factoren te voorkomen, moet een prototypekolomNMN-2wordt toegepast. Deze columnbevattensOp C18 gebaseerde, zeer zuivere silicadeeltjesdie beter in staat zijn om hydrofiele verbindingen te binden dan koolstofdeeltjes, waardoor het scheidingsvermogen wordt verbeterd.

Perchloorzuur (PCA)wordt tewerkgesteld, aangezien hetNAD+ efficiënt extraheren en NMN uit biologische monsters zoals plasma met minimale verliezen.

Om aan te passen voor matrixeffecten,eenvaste hoeveelheid (1 μM) van elk isotopische verbindingIks toegevoegd aanbiologischmonsters voorafgaand aan de PCA-extractie.

4. Het voordeelsvan dubbeltjeLC-MS/MS

Disotopische NMN-normen, NMN (M + 14) en NMN (M + 5) kunnen in de LC-MS/MS-gestuurde methodologie het lot van NMN tijdens de monsterverwerking nauwkeurig tracerenwelkeverhoogt de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van NMN-metingen in biologische monsters aanzienlijk. Bovendien kan dimeLC-MS/MS de extractie-efficiëntie en de absolute concentraties van NMN in verschillende soorten biologische monsters evalueren.

5. Conclusie

Þisnieuwe LC-MS/MS-gedreven methodologie met dubbele isotopische NMN-standaarden kunnenAccuraEn dat is precies wat er gebeurden reliabLyNMN meten in biologische monsters. Het kan worden gebruikt voor toekomstige studies naar NMN-inname.

6. Referentie

Unno, Junya et al. "Absolute kwantificering van nicotinamide mononucleotide in biologische monsters door dubbele isotoop-gemedieerde vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie (dimeLC-MS/MS)." npj veroudering vol. 10,1 2. 2 januari 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1

Waarom kiezen voorBontac?

Bontacis de leider van de wereldwijdeNmnindustrie. We hebben de eerste katalysetechnologie voor hele enzymen in China en zijn de toonaangevende onderneming in geworden co-enzymproducten die veel worden gebruikt in de gezondheidsindustrie, de medische sector en de schoonheidsindustrie,groene landbouw, biogeneeskunde en andere gebieden.OpmerkelijkBONTAC is een Nmngrondstofleverancier van het beroemde David Sinclair-team aan de Harvard University. Onze diensten en producten zijn betrouwbaar. BovendienBontacheefteen onafhankelijkeCoenzym Onderzoekscentrum voor technische technologie op provinciaal niveau in China en eigen fabrieken, waar de zuiverheid en stabiliteit van producten kan worden gewaarborgd.

Disclaimer

Þisartikel is op basis van de verwijzing in dewetenschappelijk tijdschrift. De relevante informatie isverschaffenAlleen voor deel- en leerdoeleinden, en vertegenwoordigt geen medisch advies. Als er sprake is van een inbreuk, verzoeken wij ucontactDe auteurvoorVerwijderenion. De standpunten in dit artikel vertegenwoordigen niet het standpunt vanBontac.